Мультфильм "Мой маленький пони: Девочки из Эквестрии" рассказывает о приключениях Твайлайт Спаркл, которая следует за похитившим корону Кристальной Империи вором и оказывается в альтернативном мире. Здесь она превращается в девочку-подростка и сталкивается с самым серьезным испытанием в своей жизни - старшей школой! В этом мире она встречает новых друзей, которые напоминают ей ее старых товарищей из Понивилля: Эпплджек, Рэрити, Рэйнбоу Дэш, Пинки Пай и Флаттершай. Вместе они начинают...